Interamente a doppio binario, parte del tracciato interno al [[Autostrada A90|Grande Raccordo Anulare]] è comune a quello della [[Linea B (metropolitana di Roma)|linea B]] della [[Metropolitana di Roma]], anche se ha binari indipendenti. La linea ha un tracciato interamente in sede protetta, non ha passaggi a livello, ha banchine che permettono l'accesso a raso e ha una sagoma di tipo ferroviario con larghezza di {{M|3 150|m|m}} (le linee A e B hanno una sagoma di {{M|2 950|m|m}})<ref>[{{Cita web |url=http://www.cityrailways.it/home/2012/3/19/roma-lido-potrebbe-essere-la-linea-e-della-metropolitana-rom.html |titolo=iBinari + CityRailways - ferrovie |{{!}} metro |{{!}} tram - Roma-Lido: potrebbe essere la linea E della metropolitana romana?<!-- Titolo generato automaticamente -->] |accesso=20 marzo 2012 |urlarchivio=https://web.archive.org/web/20120322041436/http://www.cityrailways.it/home/2012/3/19/roma-lido-potrebbe-essere-la-linea-e-della-metropolitana-rom.html |dataarchivio=22 marzo 2012 |urlmorto=sì }}</ref>. La linea e la linea metropolitana B hanno in comune le fermate di [[Piramide (metropolitana di Roma)|Piramide]], [[Basilica San Paolo (metropolitana di Roma)|Basilica San Paolo]] ed [[Stazione di EUR Magliana|Eur Magliana]]. All'interno del [[Autostrada A90|G.R.A.]] i treni collegano inoltre il quartiere del [[Torrino]] mentre all'esterno le zone di:[[Vitinia]], [[Casal Bernocchi]], [[Centro Giano]], [[Acilia]] e [[Ostia Antica]] per poi arrivare al quartiere di [[Ostia (Roma)|Ostia]] dove ci sono quattro stazioni ed una in zona [[Castel Fusano]]. Il capolinea sul litorale è alla [[stazione ferroviaria|stazione]] [[Stazione di Cristoforo Colombo|Cristoforo Colombo]], in corrispondenza della fine della [[via Cristoforo Colombo (Roma)|via Cristoforo Colombo]], una via che, provenendo dalla Porta Ardeatina nelle Mura Aureliane, passando per l'[[Europa (Roma)|Eur]], arriva sino ad Ostia.
