DNA ricombinante: differenze tra le versioni

Perché il gene di interesse possa essere correttamente trasportato, occorre anzitutto che sia tagliato e ridotto nei minimi termini possibili: i vettori, ed in particolare i plasmidi, non sono in grado di ospitare che quantità ristrette di materiale genetico. In seguito al taglio, il gene potrà essere ''integrato'' (cioè inserito) all'interno del vettore. L'ultima fase consiste nell'inserimento del vettore all'interno della cellula ospite: nel caso dell'inserimento di un plasmide all'interno di un batterio, ad esempio, si parla di [[trasformazione batterica]].

 

 

Una volta scelto il gene d'interesse, occorre conoscere se, alle sue estremità, presenta siti di taglio specifici per un determinato [[enzima di restrizione]]. In questo caso, è possibile procedere al taglio stesso, aggiungendo alla soluzione contenente il gene sia l'enzima che il plasmide che servirà da vettore. La maggior parte dei plasmidi, infatti, è provvista di una regione detta MCS (''multi cloning site'', ''sito di multi [[clonaggio genico|clonaggio]]''), che contiene (in poche centinaia di paia di basi) tutti i siti di taglio dei principali enzimi di restrizione. I plasmidi, spesso, sono anche ingegnerizzati in modo tale da non presentare sequenze consenso per enzimi di restrizione all'esterno delle MCS.