Sequenziamento: differenze tra le versioni
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====Pirosequenziamento====
{{vedi anche|sezione=s|[[Sequenziamento del DNA#Sequenziamento ad elevato parallelismo|Pirosequenziamento]]}}
Il pirosequenziamento è una delle nuove tecniche di sequenziamento ad elevato parallelismo, basata sul principio del "sequencing by synthesis"; sviluppata da Mostafa Ronaghi, è stata descritta per la prima volta nel 1998<ref>{{en}}{{Cita pubblicazione| autore=Ronaghi et al. |titolo=A sequencing method based on real-time pyrophosphate | rivista=Science |data=17 luglio 1998|volume=281|page=363 |url=http://www.sciencemag.org/cgi/content/full/281/5375/363 |
</ref><ref>{{en}}{{Cita pubblicazione|autore=Ronaghi et al.|titolo=Real-time DNA sequencing using detection of pyrophosphate release| rivista=Analytical Biochemistry|data=1996 |volume=242 |page=84–89 |
Questa tecnica si basa sull'utilizzo di una serie di enzimi che producono luce in presenza di [[Adenosina trifosfato|ATP]] quando un nucleotide viene incorporato nel filamento (ad opera della DNA polimerasi). Dopo l'incorporazione, i nucleotidi non incorporati vengono lavati via ed un nuovo ciclo ricomincia con l'introduzione di nuovi nucleotidi. Per ogni ciclo viene introdotto un unico nucleotide e l'incorporazione nel filamento dei nucleotidi genera una quantità di luce che è proporzionale al numero di basi incorporate in un'unica aggiunta di nucleotidi (ad esempio, nel caso di una sequenza omopolimerica tipo AAA, TTT, GGG o CCC, la quantità di luce liberata è proporzionale al numero di nucleotidi incorporati, in questo caso 3). Il lampo di luce viene registrato da un sensore CCD che ne registra l'intensità ed in base a questo può ricostruire la sequenza.
[http://www.youtube.com/watch_popup?v=nFfgWGFe0aA Video esplicativo sul Pyrosequencing]
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