Colorazione di Gram: differenze tra le versioni
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7. Ricoprire il preparato con [[Violetto di genziana]] o cristal-violetto che colora le componenti acide della parete batterica e lasciar agire per due minuti.
8. Eliminare l'eccesso di colorante e sciacquare con acqua; [[Immagine:Escherichia coli Gram.jpg|thumb|Colonia di ''[[Escherichia coli]]'' (Gram −)]]9. Ricoprire con il [[liquido di Lugol]] che funge da [https://web.archive.org/web/20170908201447/https://it.wikiversity.org/wiki/Mordenzante mordenzante]. Lasciar agire per un minuto. Far scivolare l'eccesso di Lugol e decolorare il vetrino con etanolo. A questo punto la parte esterna dei Gram -, costituita da un doppio strato lipidico e lipopolisaccaridi e legata al colorante, verrà solvatata dall'etanolo, lasciando lo strato di peptidoglicano sottostante. La parete dei Gram+ invece, formata da uno spesso strato di peptidoglicano, non verrà solvatata e rimarrà legata al cristal violetto.
10. Contrastare con safranina per un minuto. Questo colora le componenti acide rimaste libere dei Gram- e li colora in rosso, mentre non può legarsi ai componenti molecolari dei Gram+, impegnati nel legame con il cristal-violetto. Sciacquare con acqua, sgocciolare il vetrino e lasciarlo asciugare all'aria o passandolo sul bunsen.
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