Northern blot: differenze tra le versioni
Contenuto cancellato Contenuto aggiunto
m fix abbozzo |
Aggiunta referenza |
||
Riga 3:
Il '''Northern blotting''' è una tecnica che permette di visualizzare ed identificare l'[[RNA]] purificato da un campione, in particolare per studiare l'espressione genica.
Tecnicamente, è simile al [[Southern blot|Southern Blotting]], con la differenza sostanziale che l'[[RNA]] tende a formare strutture secondarie stabili in soluzione; per fare in modo che la mobilità elettroforetica sia solo dipendente dalla lunghezza del frammento, l'[[RNA]] deve essere preventivamente denaturato (solitamente esponendolo ad alte temperature). Inoltre, la corsa elettroforetica deve essere eseguita in presenza di agenti denaturanti, solitamente [[formaldeide]] e [[formammide]]. Questa tecnica è stata messa a punto nel 1977 da James Alwine e George Stark della Stanford University.<ref>Alwine JC, Kemp DJ, Stark GR. (1977): "Method for detection of specific RNAs in agarose gels by transfer to diazobenzyloxymethyl-paper and hybridization with DNA probes", ''Proc Natl Acad Sci U S A.'', 74(12):5350-5354. PMID 414220</ref>
Il nome è derivato dalla tecnica analoga per il [[DNA]] ([[Southern blot]]).
Riga 26:
===Visualizzazione===
Questa dipende dal tipo di marcatura utilizzato durante l'ibridazione. Nel caso di un [[isotopo ]][[Radioattività|radioattivo]], è possibile rilevare la posizione dell'[[RNA]] (legato adesso alla sonda marcata) esponendo la membrana ad una lastra fotografica.
== Referenze ==
<references/>
[[Categoria:Tecniche di laboratorio]]
| |||