Test Litmus milk

Il test Litmus milk è un'analisi microbiologica attraverso la quale si identificano le reazioni biochimiche metaboliche dei batteri lattici, principalmente Lactobacilli e Streptococchi lattici.

Il test si svolge seminando in una provetta con terreno Litmus milk liquido una colonia di batteri interessati.

Terreno

Litmus

Il terreno utilizzato per il test, il Litmus milk, è composto da latte scremato in polvere, indicatore al tornasole (litmus) e solfito di sodio (Na₂SO₃) in soluzione acquosa.

Reazioni

Viraggi del tornasole

Le reazioni biochimiche che si possono osservare tramite il test sono:

• Fermentazione lattica;
• Produzione di gas;
• Riduzione del terreno;
• Coagulazione del terreno (formazione della cagliata);
• Proteolisi.

L'avvenuta di una determinata reazione viene evidenziata dall'osservazione del coagulo e dal cambiamento di colore del terreno. Infatti nel Litmus milk è presente il tornasole, un indicatore di pH e di ossidoriduzione di colore viola, che vira al rosso in ambiente acido, all'azzurro in ambiente basico, al rosso-porpora nello stato ossidato e al bianco nello stato ridotto.

Risultati

• Fermentazione lattica: quando il microorganismo svolge un processo di fermentazione del lattosio, libera metaboliti acidi (principalmente acido lattico) che portano al viraggio del terreno al rosso;
• Produzione di gas: tra i prodotti della fermentazione lattico ci possono essere anche gas: il loro sviluppo si può osservare controllando se il coagulo precipitato appare tumultuoso;
• Riduzione: la fermentazione è una reazione che porta all'ossidazione del substrato (il lattosio) e la conseguente riduzione del terreno, che quindi apparirà di colore bianco. La provetta apparirà quindi colorata di bianco e rosso a macchie;
• Coagulazione: possono formarsi due tipi di cagliata
  • Quella acida, dovuta ai metaboliti acidi della fermentazione che causano porta la precipitazione di caseinato di calcio, duro e che si stacca difficilmente dalla provetta
  • Quella enzimatica, dovuta alla rennina, proteina posseduta da alcuni batteri, che grazie a una reazione proteolitica porta alla precipitazione di paracaseinato di calcio, soffice e che si stacca facilmente dalla provetta;
• Proteolisi: alcuni batteri non utilizzano come substrato il lattosio, bensì le proteine presenti nel terreno. La proteolisi è una reazione basica, che porta il terreno al viraggio all'azzurro.

Collegamenti esterni

• vlab.amrita.edu